拟南芥SHORT-ROOT基因稀有密码子分析及其在原核细胞中的表达和纯化

孙验玲; 郑玲; 穆春华; 于倩倩; 何春梅; 耿骁渝; 郑红霞; 刘霞; 《生物技术通讯 》 2016

摘要：目的:在大肠杆菌中重组表达拟南芥SHORT-ROOT(SHR)蛋白并纯化。方法:将SHR基因编码区克隆至p GEX-4T-2表达载体,构建重组质粒p GEX-4T-2-SHR并转化大肠杆菌Rosetta(DE3),表达产物经谷胱甘肽亲和层析凝胶4B分离纯化,SDS-PAGE分析和Western印迹鉴定。结果:SHR融合蛋白在大肠杆菌Rosetta(DE3)中获得表达,亲和纯化后,SDS-PAGE显示相对分子质量为预期的86×103,且经Western印迹确证。结论:获得了拟南芥SHR融合蛋白,为进一步研究其生物学功能奠定了基础。

关键词： 拟南芥 SHORT-ROOT蛋白 稀有密码子 原核表达 纯化