科研产出
猪圆环病毒1型LAMP检测方法的建立及初步应用
《山东农业科学 》 2021
摘要：为建立猪圆环病毒1型（PCV1）环介导等温扩增（LAMP）检测方法,为现场诊断提供技术支持,本试验根据GenBank公布的PCV1全基因组序列,在其保守区设计了4条特异性LAMP引物,并通过反应条件优化、敏感性试验、特异性试验以及临床样本检测,首次建立了PCV1的LAMP检测方法。结果表明,62℃水浴60 min为最佳反应条件;LAMP的检出限为1×101 copies/μL,普通PCR最低检测限为1×103 copies/μL;对猪细小病毒（PPV）、猪伪狂犬病毒（PRV）、猪圆环病毒2型（PCV2）、猪圆环病毒3型（PCV3）进行扩增,结果显示为阴性;应用该方法对103个临床疑似病料进行检测,阳性率为34.0%（35例）,普通PCR阳性率为29.1%（30例）,两种检测方法符合率为89.5%。本试验为PCV1临床检测提供了一种特异、快速、成本低廉的方法。
关键词： 猪圆环病毒1型 环介导等温扩增技术 特异性 敏感性
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鉴别绵羊肉中狐狸源性成分的环介导等温扩增检测方法的建立
《中国食品卫生杂志 》 2016 北大核心
摘要：目的建立一种能够快速区分出绵羊肉中掺入的狐狸源性成分的环介导等温扩增(loop-mediated isothermal amplification,LAMP)检测方法。方法针对狐狸线粒体Cox I基因分别设计两条外引物和两条内引物,优化LAMP反应条件后并进行特异性和灵敏性试验,对绵羊肉中狐狸源性成分进行检测。结果在0.2μmol/L外引物(F3和B3)、1.6μmol/L内引物(FIP和BIP)、0.5 mol/L甜菜碱、0.4 mmol/L d NTP、4 mmol/L Mg SO_4等参数的优化条件下,可检测出掺假率为1.0%的羊肉制品,即最低检测浓度为2×10~(-4)ng/μl。结论本文所建立的LAMP法特异性强、灵敏度高,能有效地对绵羊肉中狐狸源性成分进行检测,可作为羊肉掺假的一种快速检测方法。
关键词： 环介导等温扩增技术 动物源性成分 掺假 羊肉 狐狸肉 鉴别 食品
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猪流行性腹泻病毒LAMP检测方法的建立及初步应用
《中国动物检疫 》 2016
摘要：猪流行性腹泻病毒是引起仔猪腹泻死亡的主要病原。为实现对猪流行性腹泻病毒(PEDV)的快速检测,利用PEDV S基因设计特异性引物,通过优化各种反应条件,建立了检测PEDV的环介导等温扩增快速检测方法(LAMP)。此方法特异性好,敏感度强,将反转录后的病毒c DNA稀释到108倍仍可检出,是PCR方法的100倍。本研究建立的LAMP方法操作简便、灵敏度高、特异性强,为临床PEDV的快速检测和预防奠定基础。
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猪霍乱沙门氏菌LAMP检测方法的建立与应用
《中国动物检疫 》 2015
摘要：利用猪霍乱沙门氏菌lac Z基因设计特异性引物,通过优化各种反应条件,建立了检测猪霍乱沙门氏菌的环介导等温扩增(LAMP)快速检测方法。此方法特异性好,灵敏度高,将细菌DNA稀释到10-8仍可检出,是PCR方法的1000倍。本研究建立的LAMP方法操作简便、灵敏度高、特异性强,为临床检测猪霍乱沙门氏菌和预防人猪霍乱沙门氏菌病提供了技术保障。
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