猪圆环病毒1型LAMP检测方法的建立及初步应用

田瑶; 李佳昕; 杨莹; 王硕; 时建立; 彭喆; 李琛; 徐绍建; 吴晓燕; 刘畅; 韩红; 李俊; 《山东农业科学 》 2021

摘要：为建立猪圆环病毒1型（PCV1）环介导等温扩增（LAMP）检测方法,为现场诊断提供技术支持,本试验根据GenBank公布的PCV1全基因组序列,在其保守区设计了4条特异性LAMP引物,并通过反应条件优化、敏感性试验、特异性试验以及临床样本检测,首次建立了PCV1的LAMP检测方法。结果表明,62℃水浴60 min为最佳反应条件;LAMP的检出限为1×10¹ copies/μL,普通PCR最低检测限为1×10³ copies/μL;对猪细小病毒（PPV）、猪伪狂犬病毒（PRV）、猪圆环病毒2型（PCV2）、猪圆环病毒3型（PCV3）进行扩增,结果显示为阴性;应用该方法对103个临床疑似病料进行检测,阳性率为34.0%（35例）,普通PCR阳性率为29.1%（30例）,两种检测方法符合率为89.5%。本试验为PCV1临床检测提供了一种特异、快速、成本低廉的方法。

关键词： 猪圆环病毒1型 环介导等温扩增技术 特异性 敏感性