科研产出
基于荧光显色的IBVLAMP检测方法研究
《中国畜牧兽医文摘 》 2013
摘要：[目的]建立基于荧光显色的可视化禽传染性支气管炎病毒(IBV)环介导等温扩增(LAMP)检测体系,为IBV的快速临床检测提供有力的技术支持.[方法]根据NCBI中收录的IBV5a+5b基因的8个区域设计了3对LAMP引物,通过对反应体系各组分和条件的优化,建立IBV LMAMP检测方法,并对该方法的特异性和敏感性进行验证.分别用SYBRGreen I和一定浓度比的钙黄绿素/锰离子混合物作为显色剂,对IBVLAMP检测结果进行可视化判定.
关键词： 临床检测 荧光显色 禽传染性支气管炎病毒 技术支持 LAMP 区域设计 NCBI 反应体系
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转基因玉米PCR检测体系的优化研究
《山东农业科学 》 2011
摘要：以转基因玉米为研究材料,从模板DNA的提取质量、Mg2+浓度、退火温度、引物用量等方面对PCR检测体系进行优化,建立了检测转基因玉米中外源基因的有效PCR反应体系。在优化体系中,25mm ol/LMg2+用量由1.5μl降低为1.2μl,12.5mm ol/L引物用量由1μl降低为0.5μl,退火温度提高2℃。TouchDown PCR反应条件:95℃5m in;95℃1m in,62.5℃1m in(以后每个循环递减1℃),72℃1m in,循环15次;95℃1m in,57.5℃1m in,72℃1m in,循环20次;72℃延伸7m in。
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赤眼蜂SSR反应体系的建立
《沈阳农业大学学报 》 2006 北大核心 CSCD
摘要：以松毛虫赤眼蜂为试材,研究了单头赤眼蜂DNA的提取方法以及SSR反应体系的的主要成分对SSR扩增结果的影响。结果表明:在20μL PCR反应体系中,Mg2+的最适浓度为2.0mmol.L-1,dNTP的最适浓度为2.0mmol.L-1,引物的最适浓度为0.8μmol.L-1,Taq聚合酶的最适浓度为1.0U。利用此反应体系,对13个松毛虫赤眼蜂地理品系进行SSR反应,用6%变性聚丙烯酰胺凝胶电泳检测PCR扩增产物,不同品系间DNA谱带多态性丰富。
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油菜RAPD最佳反应体系的初步构建
《河南农业科学 》 2003 北大核心
摘要：初步构建了油菜中RAPD扩增的最佳反应体系 ,结果表明 ,油菜的RAPD扩增最佳反应体系为 :在 2 0 μl的反应体系中 ,2 .0 μl 1 0倍的反应缓冲液、1 .2 μl 2 5mmol/LMgCl2 (终浓度为 1 .5mmol/L)、2 .0 μl1 .0mmol/LdNTPs(终浓度为 0 .1mmol/L)、0 .2 μl 5U/μl的Taq酶(每反应体系为 1 .0U)、2 .0 μl 5 μmolPrimer(终浓度为 0 .5 μmol/L)、6μlDNA(约 90ng)和6.6μlddH2 O。
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