明小花蝽卵黄原蛋白的鉴定及表达分析

杜会玲; 王瑞娟; 覃冬云; 陈浩; 郭琳; 刘艳; 苏龙; 代晓彦; 赵珊; 郑礼; 董小林; 翟一凡; 《山东农业科学 》 2024

摘要：本研究对明小花蝽Orius nagaii的卵黄原蛋白(vitellogenin, Vg)进行结构分析、原核表达、抗体制备以及时空动态表达分析，旨在为昆虫卵黄原蛋白的研究提供理论依据。用RACE方法克隆出OnVg基因全长，运用生物信息网站分析OnVg蛋白得出其具有3个保守结构域：脂蛋白N端结构域、未知功能结构域以及血管性血友病因子结构域。构建OnVg的原核表达载体pET-32a-c(+)-OnVg,转至大肠杆菌进行诱导表达，通过免疫昆明小鼠制备了anti-OnVg抗体。Western blot结果显示anti-OnVg抗体与OnVg蛋白能够特异性结合。qPCR检测Vg基因在明小花蝽若虫、成虫阶段和成虫不同组织中的时空动态表达，结果表明Vg基因在若虫阶段最低，成虫阶段表达量升高且3 d时表达水平达到最高；成虫腹部表达量最高，其次是肠道和卵巢。本研究结果可为探究明小花蝽的生殖调控机理提供理论支持。

关键词： 明小花蝽 卵黄原蛋白 原核表达 抗体制备 时空表达