科研产出
利用多重荧光定量PCR检测阿胶原料驴、马、驴骡和马骡皮张的源性
《药学研究 》 2016
摘要:目的建立快速检测阿胶原料皮张源性的方法。方法根据马、驴、驴骡和马骡的核基因肌酸激酶CKM和线粒体基因组DNA(mt DNA)的16S rRNA基因序列设计特异,并引入18S r DNA作为内参质控,建立能检测4种动物源性的5重多色荧光定量PCR检测体系。结果本研究开发的引物和分子信标探针的特异性强,能同时区分同源性相近的驴、马、驴骡和马骡源性;灵敏度高,检测限为0.01 ng·μL-1。通过对某阿胶制品公司收购的驴皮源性检测,检测结果与DNA测序一致率达100%。结论本方法在一管PCR反应中能同时检测4种动物源性,更简单、准确和高效,为驴皮、马皮及骡子皮张的源性鉴定探索了新的途径。
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动物皮张基因组DNA三种提取方法比较
《山东农业科学 》 2015
摘要:以干燥的驴皮张样品为试验材料,将SDS-蛋白酶K法与Chelex-100法相结合,创新性地引入玻璃奶DNA纯化技术,提取全基因组DNA,并将此方法与前人发表的陈旧皮张DNA提取方法和试剂盒提取方法进行比较分析。结果表明,本研究发明方法提取的基因组DNA纯度较高,杂质较少,且操作简单,所用试剂、仪器费用较低,能更好地应用于分子生物学实验。
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