甜樱桃李矮缩病毒(PDV)RT-PCR检测方法的优化与应用

王文文; 刘庆忠; 宗晓娟; 陈立伟; 王甲威; 魏海蓉; 徐丽; 严雪瑞; 《中国植保导刊 》 2012 北大核心

摘要：以甜樱桃(Prunus avium L.)品种红灯的叶片为材料,提取总RNA,选用随机六聚体引物进行反转录合成cDNA,根据李矮缩病毒外壳蛋白基因设计2对特异引物,分别从感病样品中扩增出与预期片段大小相符的目的片段。通过对RT-PCR反应体系中引物、模板浓度和退火温度的优化,改进了现有的李矮缩病毒的RT-PCR检测方法,并成功用于山东泰安地区甜樱桃果园的病毒调查。另外,还可以扩增18 sRNA,实现对李矮缩病毒外壳蛋白基因表达的相对定量分析。

关键词： 甜樱桃 李矮缩病毒 RT-PCR检测 优化体系